一：
乙醇沉淀技術(shù)百科
問(wèn)題1：酒精為什么能沉淀DNA
乙醇沉淀答：此次試驗(yàn)一般會(huì)有兩個(gè)疑問(wèn)：1為什么用無(wú)水乙醇沉淀DNA？用無(wú)水乙醇沉淀DNA，這是實(shí)驗(yàn)中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點(diǎn)是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng)，對(duì)DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。DNA。
問(wèn)題2：乙醇沉淀蛋白質(zhì)低溫可逆嗎
答：低溫短時(shí)間可逆，水化膜被奪取，蛋白質(zhì)表面電荷減少，才出現(xiàn)的蛋白質(zhì)析出。但是乙醇與蛋白質(zhì)接觸過(guò)久后，會(huì)出現(xiàn)不可逆變性。
問(wèn)題3：為什么果膠用乙醇沉淀
答：果膠中含有醛基（—CHO）,乙醇中含有羥基（—OH）,醛基（—CHO)和羥基（—OH）發(fā)生反應(yīng)形成一分子水和酯類化合物!學(xué)過(guò)點(diǎn)化學(xué),只是個(gè)人認(rèn)為是這樣。
問(wèn)題4：采用乙醇沉淀法除去水提取液中多糖等雜質(zhì),應(yīng)使乙醇濃度達(dá)到()_百度
答：采用乙醇沉淀法除去水提取液中多糖等雜質(zhì),應(yīng)使乙醇濃度達(dá)到：80%的濃度有點(diǎn)小，應(yīng)該大于85%，在這個(gè)條件下。拓展內(nèi)容：1、多糖是多羥基的醛或酮，可溶于水，但是在多糖水溶液中加入乙醇會(huì)破壞多糖水溶液中的氫鍵，從而降低。
問(wèn)題5：為什么用無(wú)水乙醇沉淀DNA?
乙醇沉淀答：1DNA不溶于乙醇2乙醇可以吸附水分子（極性相同）,使得溶液中相對(duì)的水分子減少,增大了DNA在水中的相對(duì)濃度3附：乙醇沉淀DNA需要鹽離子,用金屬離子屏蔽DNA上磷酸的負(fù)電荷,降低DNA分子間的斥力,才能沉淀完全。
問(wèn)題6：乙醇沉淀一般是用來(lái)純化什么的?只有DNA嗎?
答：如果DNA的量很大,醋酸鈉和氯化鈉是不必要的它們的作用就是增強(qiáng)沉淀,純化極少量的DNA時(shí),它們就起很大的作用了要使用什么樣的鹽沉淀,要看下一步做什么了其實(shí)沉淀用的乙醇都可以使用室溫的,分子克隆上就寫到了,我用。
問(wèn)題7：乙醇分級(jí)沉淀法的原理是什么?
答：原理就是溶液中的離子強(qiáng)度不同時(shí)，不同蛋白質(zhì)的溶解度不同，步驟就是不斷加硫酸銨…以血漿為例：加到鹽濃度20~30%時(shí)纖維蛋白原沉淀，再加到濃度50%時(shí)球蛋白沉淀，飽和時(shí)清蛋白沉淀…。
問(wèn)題8：乙醇與蛋白質(zhì)的沉淀和變性實(shí)驗(yàn)
答：乙醇引起的變性與沉淀先加入蛋白液溶解，加入NaCl（鹽析）降低蛋白質(zhì)溶解度，形成過(guò)飽和溶液，再加入乙醇現(xiàn)象會(huì)更明顯些。變性的蛋白質(zhì)是不會(huì)再溶于稀酸或稀堿了，應(yīng)為變性即意味著結(jié)構(gòu)的永久改變。你的試驗(yàn)中乙醇的最終。
問(wèn)題9：乙醇沉淀能夠去除大腸桿菌毒素嗎
答：乙醇沉淀能夠去除大腸桿菌毒素實(shí)驗(yàn)室一直都是用日常型質(zhì)粒抽提試劑盒，轉(zhuǎn)染細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題。我覺(jué)得只要是注意以下2點(diǎn)就可以了：1，注意大腸桿菌(Escherichiacoli)本身的污染，收集菌體沉淀時(shí)防止菌液散落，經(jīng)常用75%的乙醇擦拭。
問(wèn)題10：飽和碳酸氫鈉溶液中加入乙醇出現(xiàn)大量白色沉淀的原因是什么?
答：乙醇是碳酸氫鈉的不良溶劑，加入乙醇使碳酸氫鈉的飽和濃度下降，所以析出。具體為什么乙醇是不良溶劑，水可以電離出氫離子與氫氧根離子，可以聚集在碳酸氫鈉電離出的鈉離子與碳酸氫跟離子外形成離子氛，使離子穩(wěn)定，而乙醇無(wú)法。
二：
乙醇沉淀技術(shù)資料
問(wèn)題1：乙醇為什么能使RNA沉淀
乙醇沉淀答：乙醇能夠消除RNA的水化層,使帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)暴露出來(lái)Na+之類的平衡離子能夠與這些帶電基團(tuán)結(jié)合,在沉淀形成部位降低多核苷酸鏈之間的排斥作用因此只有在陽(yáng)離子的量足以中和暴露的磷酸殘基的電荷時(shí)才會(huì)發(fā)生乙醇沉淀。
問(wèn)題2：70%乙醇怎么洗沉淀提取DNA最后一步,用乙醇清洗沉淀,干燥下來(lái)用雙蒸水
答：70%乙醇在洗DNA時(shí),就是把提取DNA中殘余的一些脂類等雜技除去,以保證DNA的純度,將70%的乙醇加入到提取的DNA管中,振蕩后,在高速冷凍離心機(jī)中4度低溫用大于13000rpm的轉(zhuǎn)速離心至少15分鐘,輕輕倒去上清溶液,并用干凈的吸水紙。
問(wèn)題3：為什么DNA溶液中加入乙醇會(huì)產(chǎn)生沉淀?
乙醇沉淀答：這方法應(yīng)該不是試劑盒法提取質(zhì)粒，應(yīng)該是比較傳統(tǒng)的堿法提取。在除去蛋白質(zhì)沉淀后，要加入無(wú)水乙醇使質(zhì)粒沉淀，然后離心除去上清，再加入70%乙醇清洗dna沉淀，清洗兩次左右。最后要把dna沉淀溶于te或ddh2o中。
問(wèn)題4：糖類和乙醇能產(chǎn)生沉淀嗎?
答：糖是一種多羥基醛或酮，是一大類物質(zhì)，有可溶于乙醇的，有不溶的，這與糖分子與溶劑之間相互作用及其超分子作用有關(guān)，從結(jié)構(gòu)上很難判斷（例如所謂的相似相容原理）。樓主說(shuō)的產(chǎn)生沉淀可以，不溶乙醇的糖就是沉淀，關(guān)鍵是。
問(wèn)題5：乙醇使糖原沉淀的原因
答：化學(xué)原理，一種沉淀的方式，比較優(yōu)化而已。乙醇，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式CH3CH2OH或C2H6O）是醇類的一種，有機(jī)化合物，俗稱酒精，是最常見(jiàn)的一元醇。糖原是一種動(dòng)物淀粉，又稱肝糖或糖元，由葡萄糖結(jié)合而成的支鏈多糖，其糖苷鏈為α型。
問(wèn)題6：乙醇沉淀蛋白質(zhì)有哪些注意事項(xiàng)
答：2。離子強(qiáng)度：這與介電強(qiáng)度有關(guān)。3。溶液pH值：調(diào)到目標(biāo)蛋白等電點(diǎn)周圍。4。乙醇濃度：一般來(lái)說(shuō)乙醇濃度多少，與目標(biāo)蛋白的分子量有關(guān)：比如8%，可沉淀纖維蛋白原，20%可沉淀球蛋白，40%可沉淀白蛋白等等，當(dāng)然，乙醇。
問(wèn)題7：乙醇沉淀DNA利用了核酸的什么性質(zhì)
答：核酸中的DNA不溶于乙醇，而核酸中的蛋白質(zhì)溶于乙醇所以能利用乙醇分離出核酸中的DNA。
問(wèn)題8：水提醇沉的要求
乙醇沉淀答：水提醇沉淀法（水醇法）：先以水為溶媒提取藥材有效成分，再用乙醇沉淀除去雜質(zhì)的方法。利用水、乙醇對(duì)有效成分和無(wú)效成分溶解度的不同使之分離精制。(一)工藝依據(jù)：通常含醇量50~60%時(shí)淀粉、多糖沉淀。60%或70%以上。
問(wèn)題9：為什么加入乙醇沉淀多糖時(shí)有絮狀物
乙醇沉淀答：用70%的酒精是因?yàn)檫@個(gè)濃度對(duì)沉淀DNA效果最好,并且異丙醇能溶于酒精,去除異丙醇,然后揮發(fā)酒精,似乎還能除鹽個(gè)人見(jiàn)解異丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗只有醋酸鈉乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的鹽,乙醇濃度。
問(wèn)題10：乙醇引起的蛋白質(zhì)變性與沉淀為什么鹽酸加入之后沉淀消失
乙醇沉淀答：可能是被鹽酸水解成氨基酸了整體結(jié)構(gòu)已經(jīng)破壞了,一些堿性氨基酸和鹽酸反應(yīng)成離子形態(tài)的鹽,酸性氨基酸也能溶解在鹽酸里所以沉淀消失了。
三 ：